Quais são os lentivírus?

O Lentivírus, de latim lenti o que significa lento, eles são vírus que exigem muito tempo, entre meses e anos, desde a infecção inicial até o aparecimento da doença. Esses vírus pertencem ao gênero Lentivírus e retrovírus (família Retroviridae), que têm um genoma de RNA que é transcrito para o DNA através da transcriptase reversa (TR).

Na natureza, o lentivírus está presente em primatas, ungulados e felinos. Por exemplo, em primatas, existem duas linhagens filogeneticamente relacionadas: vírus da imunodeficiência de macacões (SIV) e vírus de imunodeficiência humanos (HIV) (HIV). Ambos são os agentes que causam a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS).

Fonte: PhD Dre na Wikipedia inglesa [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenças/BY-SA/3.0)]

Lentivector, obtido do lentivírus, tem sido amplamente utilizado para pesquisas básicas em biologia, genômica funcional e terapia de genes.

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Estágios do ciclo de vida do retrovírus

O ciclo de vida de todo o retrovírus começa com a união do organismo a um receptor específico na superfície da célula, seguido pela internalização do vírus por endocitose.

O ciclo continua com a eliminação da cobertura do vírus e a formação de um complexo nucleoproteína viral (VNC), que consiste em genoma viral associado a proteínas virais e celulares. A composição do complexo muda ao longo do tempo e está relacionada à conversão, através do TR, do genoma do invasor em uma hélice de DNA duplo.

A integração do genoma do vírus à da célula dependerá da capacidade do genoma viral para penetrar no núcleo hospedeiro. A reorganização do VNC tem uma importação importante na importação para o núcleo, embora proteínas celulares importantes, como Transportin-SR2/TNPO3, importação-alfa3 e importação7 também influenciem o núcleo.

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Proteínas virais, como integrar, e fatores de transcrição da célula hospedeira, como o LEDCF, são fundamentais na integração do genoma viral.

Isso usa a maquinaria da célula hospedeira para transcrever e traduzir proteínas virais e montar virions, liberando -os no espaço extracelular.

De lentivírus ao lentivector

O genoma de retrovírus possui três quadros de leituras abertas (MLA) para diferentes elementos virais. Por exemplo, capsídios e matriz (gen mordaça), enzimas (gen Pol) e envoltório (gen enviar).

A construção de um vetor viral consiste na eliminação de alguns genes do vírus selvagem, como os relacionados à virulência. Dessa maneira, um vetor viral pode infectar células eucarióticas, retro-transcrever, integrar-se ao genoma da célula do eukaryot do hospedeiro e expressar o transgênico (inserido Gen terapêutico) sem causar doença.

Um método de construção de lentivector é transfecção de transição. É baseado no uso de minigenomas virais (chamados construções) que transportam apenas os genes de interesse. A transfecção de transição consiste em construção independente de construções.

Alguns retrovetores têm apenas elementos principais para a montagem de partículas virais, chamadas de retrovectores não funcionais. Eles são usados ​​para transfectar células de embalagem.

Vetores com uma fita de expressão transgênica são capazes de infectar, transformar células (transdução) e expressar transgenar.

O uso de construções separadas visa evitar eventos de recombinação que possam restaurar o fenótipo selvagem.

Tecnologia Lentivector

A tecnologia lentivector tem um amplo uso em biologia básica e estudos de tradução para a superexpressão de transgenes estáveis, a edição de genes direcionados pelo local, o silenciamento de genes persistentes, a modificação das células -tronco, a geração de animais transgênicos e a célula pluripotente.

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Os lentivetores constituem fácil manipular e produzir sistemas. Eles são integrados irreversíveis e certamente o genoma hospedeiro. Células infectas que estão ou não em divisão.

Eles mostram tropismo em relação a certos tecidos, facilitando a terapia. Eles não expressam proteínas virais, então têm baixa imunogenicidade. Eles podem enviar elementos genéticos complexos.

Na pesquisa básica, os lentivectores baseados em HIV têm sido usados ​​como sistemas de envio de RNA de interferência (RNAi) para eliminar a função de um gene específico, permitindo assim estudar a interação com outros diferentes.

Lentivector obtido do HIV

No início dos anos 90, os primeiros lentivectores foram construídos a partir do HVI-1, que está intimamente relacionado ao SIV de Chimpanzee. O HVI-1 é responsável pela Aids em todo o mundo.

A primeira geração de lentivector tem uma parte significativa do genoma do HIV. Inclui genes Garota e Pol, e várias proteínas virais adicionais. Esta geração foi criada usando duas construções. Um deles, que expressa navios, fornece funções de embalagem. Outro expressa todo o MLA, com exceção do envio.

O vetor de transferência consiste em um cassete de expressão marcado por dois tipos de longas repetições (LTR) e genes necessários para embalagem e transcrição reversa.

A segunda geração de vetores de embalagem carece da maioria dos genes acessórios e retenha o TAT e o REV. Esses genes foram removidos na terceira geração e fornecidos por um quarto construto.

Os vetores de transferência de terceira geração são compostos de duas construções de embalagem. Um codifica Garota e Pol. Outro coda Rev. Um terceiro construto codifica o envelope, que é derivado do VSV-G. Aquele que codifica o gene do interesse contém sequências inativadas por LTT LTT para evitar a recombinação.

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No último caso, os elementos regulatórios da transcrição aumentam o desempenho dos genes de transferência.

Lentivector obtido de outros vírus

O vírus HIV-2 está intimamente relacionado ao Magabey Gris SIV (SIV_VÓS) e é responsável pela Aids na África Ocidental. A partir deste vírus, os vetores de primeira e segunda geração foram obtidos.

Semelhante ao HVI-1, do SIV_VÓS, do EIAV (vírus da anemia infecciosa), da fertilização in vitro (vírus da imunodeficiência felina) e o BIV (vetores de vírus da imunodeficiência bovina (BIV) de três gerações foram construídos. Os vetores baseados em EIAV foram desenvolvidos para uso clínico.

A partir do vírus da artrite-artrite caprina (CAEV), os vetores de primeira e terceira geração foram construídos. Enquanto da URI do macaco verde africano, os vetores de primeira geração foram construídos.

Referências

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