Fundação Half Stuart, Preparação e Usos

Ele Meio Stuart É um ágar semi -sólido ou um caldo sem nutrientes, usado para o transporte de amostras biológicas. Seu objetivo é manter as cepas presentes na amostra viável por um certo tempo, mas sem aumentar a população microbiana.

Foi criado por Moffet, Young e Stuart em 1948 e subsequentemente modificado por Toshach e Patsula. É composto de gliceofosfato de sódio, tioglicilcoato de sódio, cloreto de cálcio e adição de ágar. O último está presente no meio semi -sólido e ausente no líquido. Alguns laboratórios adicionam azul de metileno.

Culturette com Stuart Transport. Fonte: por: CDC/DR. Gilda Jones, cortesia: Biblioteca de Imagens de Saúde Pública

Eles geralmente são usados ​​quando não é possível semear a amostra imediatamente. Nesse caso, a amostra é colocada nos meios de transporte, enquanto é transferida para o laboratório que processará a colheita.

Dessa maneira, é garantido que os microorganismos presentes permaneçam vivos até serem inoculados no meio de cultura correspondente.

Inicialmente, seu uso foi destinado a transportar amostras uretrais ou vaginais onde a presença de Neisseria gonorrhoeae. Posteriormente, eles perceberam que sua utilidade poderia ser mais ampla.

O meio Stuart acabou sendo muito eficiente na preservação de microorganismos lábilos e irritantes Neisseria Meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium difteriae, Bordetella Pertusis, entre outros. Além de outros microorganismos não anônomos, como a Enterobacteria.

O meio Stuart evita basicamente a dessecação da amostra, mantém o equilíbrio osmótico e mantém microorganismos para um pH ideal. Por outro lado, estrategicamente esse meio não contém nutrientes, isso impede que os microorganismos multipliquem.

No mercado, existem shows especiais para transportar amostras que contêm esse ou outro meio de transporte, chamado Culturette. Eles também podem ser preparados em laboratório.

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Base

O fim do meio de transporte Stuart é manter as amostras mais próximas de seu estado original, até que seja processado.

O gliceofosfato de sódio e o cloreto de cálcio é um sistema tampão que age mantendo o pH e a osmolaridade.

Enquanto, o tioglicato de sódio atua como um agente redutor e, no caso de conter isso, confere a consistência semi -sólida, para atrasar a oxigenação do ambiente. Finalmente, o azul de metileno é um indicador de oxidação, ou seja, detecta a presença de oxigênio.

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O meio semi-sólido com indicador redox é ideal para o transporte de amostras onde suspeita a presença de bactérias anaeróbicas.

Características dos meios de transporte

O meio Stuart, como qualquer meio de transporte, atende a certas características, incluindo:

-Manter viável as cepas microbianas presentes sem multiplicar.

-Não contém nutrientes; Seus compostos visam manter a amostra hidratada, em condições adequadas de pH e osmolaridade.

-Inibe o autolisado de alguns microorganismos delicados, como o pneumococcus.

-Seu uso é temporário, não deve ser estendido demais.

Preparação

Stuart semi-sólido com indicador redox

Preparação caseira

Ingredientes

Gliceofosfato de sódio 10 gr

Sódio TioglyCoate 1.0 gr

Cloreto de cálcio 0.1 gr

Blue de metileno 0.002 gr

Agar -gar 3 gr

Água destilada 1 l

Misture os componentes e aqueça a solução total. Despeje tubos ou escobilões especiais. Eles são introduzidos na Autoclave e esterilizados a 121 ºC por 15 minutos. Deixe os tubos esfriarem verticalmente (na forma de um taco). Quarto à temperatura ambiente.

Preparação com meio comercial

Pese 14,1 gr de meio em 1 litro de água destilada. Aquecer frequentemente agitando até sua dissolução total, você pode deixar ferver. O restante do procedimento como já descrito.

O meio desidratado é creme e preparado deve ser azul em sua superfície. Isso se deve à presença de azul de metileno.

O pH do meio deve ser ajustado para 7,4 ± 0,2

Stuart líquido meio modificado (preparação caseira)

Ingredientes

Gliceofosfato de sódio 10 gr

Sódio tioglycoate 1 gr

Cloreto de cálcio dihidrado 0,1 gr

1000 ml de água destilada

Ele carrega os mesmos ingredientes que o semi-sólido, mas não carrega ágar ou azul de metileno. Nesse caso, os componentes sem aquecimento são misturados e 0,5 ml são distribuídos em tubos de 16 x 125 mm com uma tampa de rosca.

Esteriliza em autoclave a 121 ° C por 10 minutos. Para Take -Sam.

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Os tubos são armazenados à temperatura ambiente.

Formulários

Comercialmente, existem dispositivos especiais para transportar amostras chamadas Culturette; Este dispositivo é um tubo alongado e fino que traz um swab para dentro e, no final.

O dispositivo é aberto e com o swab pega a amostra. Em seguida, é introduzido novamente no tubo até que a ponta do swab seja inserida no meio de transporte semi-sólido; Alguns trazem uma esponja de poliuretano impregnada com meio líquido Stuart, com o qual a amostra é preservada ao permanecer molhado.

No caso de suspeita de que a presença de microorganismos delicados.

As amostras que podem ser coletadas com swabs ou vassouras e transferidas neste meio são exsudatos faringeis, swabs retais e várias secreções, incluindo: vaginal, uretrals, feridas, oculares, óticos e abscessos.

Durante a transferência da amostra nos meios de transporte para o laboratório, a submissão do meio ambiente a condições ambientais extremas (muito frio ou muito calor) deve ser evitada (muito frio ou muito calor). Mudanças repentinas de pressão atmosférica também devem ser evitadas.

O tempo em que o meio é capaz de manter um microrganismo viável dependerá da tensão em questão. Por exemplo, para microorganismos do gênero Neisserias e Haemophilus pode ser mantido viável por até 24 horas, mas cepas como Salmonella ou Shigella podem durar dias e até semanas.

Se estima -se que o processamento da amostra possa levar mais de 4 dias, é preferível congelar a amostra a -70 ° C.

Identificação de amostra em meios de transporte

A mídia de transporte preparada ou a cultura comercial devem ter um rótulo onde os seguintes dados serão colocados:

Nome e sobrenome do paciente: Evite amostrar confusão.

Número de identificação: É conveniente trazer um pedido no trabalho.

Fonte de amostra: Ajude o bacteriologista da escolha da mídia de cultura apropriada.

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Tratando o médico: Às vezes é necessário para possíveis consultas.

Data e hora da amostra: É necessário para a aceitação ou rejeição da amostra de acordo com o tempo decorrido entre a amostra e a recepção no laboratório.

Outras informações que seriam muito úteis para o anexo são:

O diagnóstico presuntivo: Guia na adição de meios de cultura especial de acordo com a suspeita de diagnóstico.

Tratamento de antibióticos: É útil ser anexado ao antibiograma.

Toda essa informação é vital para garantir o bom processamento da amostra.

Controle de qualidade

Para avaliar a operação do meio Stuart, você pode inocular cepas conhecidas e mantidas a 25 ° C, como: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Em todos os casos, espera -se que recupere o microrganismo em questão, preservado por 24 horas.

Por outro lado, outras cepas como: Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e Escherichia coli ATCC 11775.

Em todos os casos, é esperada uma recuperação abundante por até 96 horas.

Limitações

Alguns estudos garantem que o gliceofosfato presente no meio de Stuart possa ser metabolizado por alguns coliformes, entre outras bactérias gram -negativas e, portanto, se multiplica neste meio.

Este risco aumenta quanto mais o processamento da amostra é atrasado. Da mesma forma, a exposição do meio Stuart em altas temperaturas durante sua transferência influencia este particular.

Referências

1. “Médio de transporte (microbiologia)." Wikipedia, enciclopédia livre. 13 de abril de 2018, 10:36 UTC. 1 de abril de 2019. Disponível em: este.Wikipedia.org
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