Agar MacConkey

Escherichia coli colônias em uma placa de ágar MacConkey. Com licença

Qual é o ágar MacConkey?

Ele Agar MacConkey É um meio de cultura sólido. seletivo e diferencial, que permite o isolamento exclusivo de bacilos negativos Gram. Por esse motivo, permite distinguir entre fermentação e não -fermentação bacilos de lactose. É um dos meios de cultura mais usados ​​em um laboratório de microbiologia.

Este meio é usado principalmente para isolar bacilos gram -gram pertencentes à família Enterobacteriaceae, incluindo espécies oportunistas e enteropatogênicas.

Também pode ser usado para isolar outros bacilos entéricos que habitam o trato gastrointestinal, mas que não pertencem a Enterobacteriaceae, como Spere SP, Pesiomonas sp, entre outros.

Finalmente, pode isolar outros bacilos de glicose não fermentativos encontrados em ambiente, água ou solos, mas às vezes podem ser patógenos oportunistas, como Pseudomonas sp, Acinetobacter SP, SP, Chromobacterium vioaceum, Stenotrophomonas maltofilia, entre outros.

Base

Agar MacConkey

A base deste meio pode ser explicada através da descrição de seus componentes, uma vez que cada um tem um objetivo que determina uma propriedade.

Sais biliares e vidro violeta

Nesse sentido, o Agar MacConkey tem uma composição complexa. Primeiro, ele contém sais biliares e vidro violeta.

Esses elementos são responsáveis ​​por inibir o crescimento de bactérias gram -positivas e alguns bacilos Gram -negativos exigentes. Por sua vez, favorece o desenvolvimento de bacilos Gram -negativos que não são afetados por essas substâncias. Portanto, é um meio seletivo.

Dizem que é um pouco seletivo em comparação com outros meios que também inibem o crescimento de bactérias gram -positivas e também da maioria das bactérias Gram -negativas.

Peptonas, pólipos e lactose

Ele contém substâncias que fornecem os nutrientes necessários para os microorganismos que se desenvolvem neste meio, como peptonos, pólipos e lactose.

A lactose é o ponto principal para o meio ser diferencial, pois os microorganismos que têm a capacidade de fermentar a lactose desenvolverão fortes colônias rosa.

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Algumas bactérias podem fermentar lactose lenta ou fracamente, desenvolvendo colônias rosa pálidas e permanecem positivas para lactose.

Aqueles que não ferram lactose usam peptonos como fonte de energia, produzindo amônia, alcalando o meio. Portanto, as colônias que se originam são incolores ou transparentes.

Indicador de pH

A mudança de cor é alcançada através de outro composto essencial que o MacConkey concorda. Este composto é o indicador de pH, que neste caso é o vermelho neutro.

A fermentação de lactose gera produção de ácido misto. Eles acidificam o meio para um pH abaixo de 6,8.

Isso faz com que o indicador de pH vire em direção a um toque rosa intenso. A intensidade da cor pode variar dependendo do pH final.

Água destilada, cloreto de sódio e ágar

Por outro lado, contém água destilada e cloreto de sódio que dão hidratação e equilíbrio osmótico ao meio ambiente. Finalmente, o meio contém ágar, que é a base que fornece a consistência de meio sólido.

O ágar MacConkey preparado deve ter um pH final ajustado para 7,1 ± 0,2.

Preparação

Para um litro de ágar MacConkey, 50 gr do meio desidratado deve ser ponderado, então ele é colocado em uma correção e dissolve -se em um litro de água destilada. Após 10 minutos de descanso, é aquecido misturando -se constantemente até ferver por 1 minuto.

Em seguida, a fixola é colocada na autoclave e esterilizada a 121 ° C por 20 minutos. Tempo culminado, é removido da autoclave e deixado esfriar até que uma temperatura de 45 ° C seja alcançada, para servir posteriormente em Petri estéril.

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Deixe solidificar e salvar em um suporte invertido e leve à geladeira em uma geladeira a 2-8 ° C até o uso.

Para obter um ágar MacConkey que inibe o efeito de agitação produzido pelo gênero Proteus Um ágar MacConkey baixo é usado em sal.

Usa o Agar MacConkey convencional

• O Agar MacConkey está incluído em todos os conjuntos de mídias de cultura organizadas para a semeadura das amostras clínicas recebidas no laboratório. Também é útil em microbiologia alimentar e microbiologia ambiental.
• A variedade de bacilos Gram -negativos que crescem neste meio expressam características fenotípicas que ajudam um diagnóstico presuntivo das espécies em questão. Por exemplo, o tamanho, a cor, a consistência e o cheiro de colônias são algumas das características que podem guiar.
• Nesse ambiente, as espécies de Escherichia coli, Klebsiella sp e Enterobacter sp Produza fortes colônias rosa, cercadas por uma zona biliar precipitada.
• Enquanto bactérias como Citrobacter SP, Providence SP, Serratia SP e Hafnia SP Eles podem aparecer sem cor após 24 horas ou rosa pálido em 24-48 horas.
• Além disso, os gêneros Proteus, Edwadsiella, Salmonella e Shigella produzir colônias incolores ou transparentes.

Outras variantes de ágar MacConkey

Existem outras variantes de ágar MacConkey que têm fins específicos. Eles são mencionados abaixo:

• Agar MacConkey com Sorbitol: Este meio foi projetado para distinguir a tensão enteropatogênica (Escherichia coli Enterohemorrágica O157: H7) do resto das cepas de Escherichia coli. Este meio muda de carboidrato de lactose para sorbitol. As cepas de E. coli Enterohemorrágicas O157: H7 diferem do resto porque não ferram o sorbitol e, portanto, são obtidas colônias transparentes, no entanto, o restante das cepas E. coli Sim fermentando o sorbitol e as colônias são fortes rosa.
• Agar MacConkey sem cristal violeta, ou sal: Este ágar difere muito do ágar clássico de MacConkey, porque não ter cristal violeta pode cultivar bactérias gram -positivas. Por outro lado, a ausência de Sal inibe a aparência do enxame no ágar produzido por alguns bacilos entéricos, como os do gênero Proteus, e, assim, facilitar o isolamento de todas as bactérias presentes, incluindo bactérias gram -positivas.
• Agar MacConkey com CefopeZone: Esta variante MacConkey Agar foi projetada para isolar inicialmente Laribacter hongkongensis E depois eles perceberam que era útil isolar Arcobacter Butzleri. PARAOs MBOs são um bacilos -gramas ligeiramente curvos resistentes à cefoperazona. Essas bactérias foram recentemente ligadas como causando gastroenterite e diarréia adquirida em indivíduos asiáticos e europeus, perfil como dois poderosos patógenos emergentes. O antibiótico permite inibir a flora que o acompanha do trato gastrointestinal, o que favorece o desenvolvimento dessas bactérias, impedindo -as de passar despercebidos, pois exigem 72 horas para crescer.
• Agar MacConkey preparado com água do mar 10% v/v: Esta variante é útil para a avaliação de indicadores sanitários bacterianos de contaminação fecal, incluindo coliformes totais e coliformes fecais em águas salgadas recreativas (praias e baías). Os pesquisadores mostraram que o meio preparado dessa maneira aumenta significativamente a recuperação desses microorganismos no ambiente salino, em comparação com o uso de ágar MacConkey preparado com água destilada. Isso ocorre porque, no meio modificado, o crescimento de bactérias que são fisiológicas em um estado de latência "viável, mas não cultivável" é estimulado; portanto, eles não são recuperáveis ​​em mídia convencional.

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Referências

1. Forbes, b., Sahm, d., Weissfeld, a. Diagnóstico microbiológico de Bailey & Scott. Pan -American Editorial S.PARA.
2. Koneman, e., Allen, s., Janda, w., Schreckenberger, p., Winn, w. Diagnóstico microbiológico. Pan -American Editorial S.PARA.