Agar nutritivo

Esfregar bacteriano com e. Agar nutritivo coli. Fonte: Martin Priestley, CC BY-SA 4.0, Wikimedia Commons

O que é um ágar nutritivo?

Ele Agar nutritivo É um meio de cultura sólido não seletivo e não diferencial. Nesse ambiente.

É um meio simples e, apesar do nome, contém uma nutrição mais baixa.

Sua utilidade no laboratório é muito variada. Principalmente, serve para a subcultiva de espécies, manutenção de cepas, colônias de contagem, como base para a preparação de sangue, entre outros.

Além disso, devido à sua cor bege leve, a produção de pigmentos gerados por algumas cepas bacterianas, como o pigmento esverdeado de Pseudomonas aeruginosa, O pigmento vermelho de tijolos produzido por Serratia Marcescens À temperatura ambiente, o pigmento amarelo dourado de Staphylococcus aureus, entre outros.

Além disso, é um dos meios de cultura mais econômicos encontrados no mercado.

Base

Como mencionado acima, é muito simples significa que se baseia no fornecimento de substâncias nutricionais para o crescimento bacteriano sem restrição e sem reações complexas para interpretar.

Como o meio é translúcido, é ideal contar colônias pelo método de profundidade plantado.

Composição

É composto principalmente de extrato de carne ou levedura, peptonas ou gelatina pancreática, agar-gaugar, cloreto de sódio e água destilada.

O extrato de carne ou leveduras e peptonos representa as fontes de carbono e minerais essenciais (nitrogênio, fósforo e enxofre), que serão usados ​​por bactérias como fonte de energia e fatores de crescimento.

Da mesma forma, o ágar -gar é a base de todos os meios de cultura sólidos, substituindo a gelatina, que foi o primeiro composto base usado por Robert Koch para dar consistência sólida à sua mídia.

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O ágar é um polissacarídeo composto por galactose, galactomanano, agarose e agarpecto. Cumagem a 40 ° C e derrete perto de 100 ° C.

Por sua parte, o cloreto de sódio fornece o ambiente necessário para o desenvolvimento bacteriano.

Finalmente, a água serve para hidratar e dissolver compostos liofilizados. Água destilada ajustada ao pH neutro deve ser usada. A água atual não deve ser usada porque contém cálcio e magnésio, o que pode reagir com os fosfatos do ambiente e formar sais insolúveis.

Preparação

Para um litro de ágar nutritivo, você deve pesar 31 gr do meio desidratado. É colocado em uma fixola e se dissolve em um litro de água destilada. Após 5 minutos de descanso, aqueça uma fonte de calor e misture constantemente até ferver por 1 ou 2 minutos.

Em seguida, a fixola é colocada em uma autoclave e esterilizada a 121 ° C por 20 minutos. Tempo culminado, é removido da autoclave e é servido em Petri estéril.

Se as placas de Petri forem descartáveis ​​(plástico), o meio deverá ser distribuído quando o ágar tiver uma temperatura aproximada de 50 ° C, para impedir que elas deformem o calor excessivo.

Deixe solidificar e salvar em um suporte invertido e leve à geladeira em uma geladeira a 2-8 ° C até o uso.

As placas devem ser temperadas antes de serem plantadas. As placas de ágar nutritivas não devem ser usadas se estiverem contaminadas ou desidratadas.

O pH médio preparado deve ser ajustado para 7,3 ± 0,2.

Formulários

É o meio de cultura mais simples usado no laboratório de microbiologia. Sua formulação é excelente para o crescimento de bactérias que não têm de queda.

Seus principais usos são os seguintes:

• Como base para a preparação de ágar de sangue: Às vezes é usado como base para a preparação de sangue, no entanto, não é a base mais usada.
• Estimular a esporulação de bactérias que formam esporos: É especialmente útil estimular a esporulação de bactérias que formam esporos, como Bacillus sp. Para isso, uma tensão do gênero é semeada Bacilo e incubates por 24 horas a 37 ° C em aerobiose. Uma vez que as colônias são cultivadas, a placa é submetida a um estresse de temperatura, ou seja, a temperatura do fogão a 44 ° C é aumentada e deixada por mais 24 horas, ou é introduzida em uma geladeira por 24 horas. No final dos tempos, eles são estendidos da colheita e manchando com grama manchas ou manchas de esporos Shaeffer-Fulton. Eles observarão os bacilos com endosporos (esporos dentro do Bacillus) e Exospor (esporos fora do Bacillus).
• Manutenção de cepas: Algumas pesquisas ou laboratórios de apoio a professores exigem bactérias viáveis ​​de importância clínica pelo maior tempo possível, com o objetivo de usar o Banco de Bactérias (Bacterooteca) para o trabalho de pesquisa ou para a preparação de práticas de ensino, onde os alunos aprenderão a manipular e identificar estes microorganismos. O ágar nutritivo, assim como a infusão de coração do coração, podem ser usados ​​para esse fim. O ágar é preparado, derramado em tubos com tampa de baquelita e inclinada em uma base, de modo que o ágar solidifica a formação de um taco no fundo e um painel na superfície (pico de flauta). Cada tubo é rotulado colocando o nome das bactérias que serão semeadas e a data. Cada uma das bactérias será semeada no painel e será incubada por 24 horas, uma vez que as colônias estiverem crescendo. Os tubos são armazenados à temperatura ambiente. O Bacteroteca deve ser renovado de 1 a 3 meses, para evitar contaminação e desidratação do ambiente, bem como a morte de bactérias. Somente bactérias não querem ser mantidas dessa maneira.
• Colônias: Embora existam meios especializados para a contagem de colônias, como a contagem padrão, o ágar nutritivo pode ser usado para esse fim, seja por superfície semeada com drigalski spatula ou por profundidade. Portanto, é muito útil na análise microbiológica de alimentos e água.
• Execução de testes de diagnóstico: Porque é um meio que não contém sangue, nem qualquer outro aditivo, é ideal para tomar colônias cultivadas neste meio para realizar o teste da catalase. Além disso, devido à sua cor clara, é indicado para fazer testes de oxidase diretamente em uma área da gama semeada, sem interferência.
• Recuperação aeróbica mesofílica de água recreativa (praias): Agar nutriente preparado com 10% de água do mar é útil para a avaliação de aeróbios mesofílicos nas águas das praias. Dessa forma, você pode ver o nível de poluição real que as águas têm com esses microorganismos, pois, nesse tipo de amostras, os resultados são sobrepostos quando a mídia preparada da maneira convencional é usada. Isso é explicável devido à mudança abrupta sofrida pelas bactérias ao passar de um ambiente hipersalizado para um ambiente de baixo sal; portanto, os microorganismos entram em um estado de letargia em que são viáveis, mas não cultiváveis.

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Referências

1. Forbes, b., Sahm, d., Weissfeld, a. Diagnóstico microbiológico de Bailey & Scott. Pan -American Editorial S.PARA.
2. Koneman, e., Allen, s., Janda, w., Schreckenberger, p., Winn, w. Diagnóstico microbiológico. Pan -American Editorial S.PARA.