Coloração simples

O que é uma coloração simples?

O Coloração simples É um procedimento de coloração rápido e simples no qual um único corante é usado, por isso é chamado de simples. É usado principalmente para determinar a morfologia e a organização das células presentes em uma amostra.

Naturalmente, as células não têm cor, por isso é necessário torná -las visíveis de alguma forma quando são observadas no microscópio.

É importante destacar que os corantes usados ​​em coloração simples devem ser básicos com carga positiva (catiônica), para que possam se juntar espontaneamente na parede e no citoplasma celular.

Essas estruturas celulares são carregadas negativamente. Portanto, o corante, carregado positivamente, é atraído pelas células e se junta a eles espontaneamente. Assim, todas as células presentes em uma amostra são rapidamente coloridas.

Cores para colorir em manchas simples

Existem vários corantes básicos que podem ser usados ​​no laboratório de microbiologia. Os mais utilizados são:

• Azul de metileno.
• Violet de cristal.
• Verde malaquita.
• Fuchsin básico.

Todos esses corantes funcionam bem em bactérias porque possuem íons coloridos (cromóforos) com carga positiva (catiônica).

Os tempos de coloração para a maioria dos corantes são relativamente curtos. Geralmente, eles variam de 30 segundos a 2 minutos, dependendo da afinidade do corante.

É importante ter em mente que, antes de tingir uma amostra por coloração simples, ela deve ser estendida e fixa à folha de vidro (deslizamento). A amostra estendida e fixa é chamada de esfregaço.

Procedimento

Passo 1

Coloque o slide em uma prateleira de coloração e aplique o corante desejado. Deixe o Time Act correspondente.

Normalmente, a coloração simples leva alguns segundos ou alguns minutos, dependendo da cor para colorir.

Observação

Nesta etapa, é importante não exceder o tempo recomendado para o corante usado, pois os cristais podem ser formados na folha, produzindo o que é conhecido como "artefatos", que distorcem a morfologia das células.

Passo 2

Lave cuidadosamente a mancha da lâmina com água destilada de uma garrafa ou com água da torneira que flui lentamente, até que o escoamento se torne transparente. Em geral, isso leva de 5 a 10 segundos.

Observação

Não aplique a corrente de água diretamente no cheiro, para evitar a força do mesmo dano.

Se não houver água destilada, a água da torneira pode ser usada sem problemas, pois não afetará o resultado da mancha.

etapa 3

Secar o slide com toalhas de papel absorvente em um sentido e sem esfregar. Verifique se a parte inferior do slide está limpa.

Passo 4

Observe o mancha tingido no microscópio. Comece com os objetivos mais distantes de localizar corretamente a área que você deseja observar com mais detalhes. Altere o alvo para se aproximar e mais da amostra.

Observação

Para o uso do objetivo com o maior aumento (normalmente 100x) de imersão, o óleo deve ser usado, pois isso ajuda a luz a penetrar melhor e que a imagem parece mais clara. Não é necessário usar uma cobertura.

Etapa 5

Finalmente, descarte todas as amostras em um recipiente apropriado que é devidamente rotulado como "risco biológico".

Formulários

• Observação da morfologia celular.
• Observação de amostras em laboratórios químicos, para determinar a presença de bactérias, vírus, etc.
• Identificar agentes infecciosos e diagnosticar corretamente.
• Como uma ferramenta indispensável em microbiologia.
• Saber se uma bactéria tem uma cápsula ou não, e saber que tipo ela pertence.

Referências

1. Aplicações microbiológicas: Manual de Laboratório em Microbiologia Geral. As empresas McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Uma introdução à biotecnologia prática. Firewall da mídia.