Características de lactofenol azul, composição, preparação, usa

Ele Lactofenol azul ou algodão azul é uma preparação com propriedades simples de coloração. É usado em laboratórios clínicos para colorir principalmente estruturas de fungos, como hifas, tubos germinativos e esporos.

Ajuda no diagnóstico presuntivo ou preliminar de certos fungos, no entanto, é sempre aconselhável fortalecer o diagnóstico com testes mais específicos, como testes bioquímicos ou sorológicos.

Representação gráfica do corante azul de lactofenol, mancha tingida com lactofenol azul, preparação montada em microscópio. Fonte: fotos de domínio público.net/https: // www.YouTube.com/relógio?v = p-kiffz7nvu/https: // www.YouTube.com/relógio?V = wsz77t5l6e8

Lactofenol azul é composto de ácido lático, azul anilina, glicerina, fenol e água desionizada. Pode ser preparado em laboratório ou pode ser comprado pronto para uso. Uma vez preparado, está pronto para ser usado, em nenhuma circunstância deve ser diluída, pois essa ação dará resultados ruins.

A concentração de seus componentes torna ideal para tingir as estruturas fúngicas, porque o fenol elimina a microbiota bacteriana que o acompanha, enquanto o ácido lático gera um filme de proteção ao redor da estrutura fúngica. Finalmente, Anilina Blue tem uma afinidade em aderir às estruturas de fungos.

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Base

Com lactofenol azul, é realizada uma coloração simples das estruturas fúngicas de uma certa cultura micológica. É chamado de simples porque usa um único corante.

O lactofenol azul, além de dyuring, também atua como uma amostra de esclarecimento, graças à ação conjunta do ácido lático e do fenol, além disso, o fenol se comporta como um mordente e, ao mesmo tempo, evita a lise do microorganismo inibindo as enzimas hidrolíticas que elas pode estar presente.

Enquanto o ácido lático preserva a morfologia das estruturas de fungos.

Por outro lado, Anilina Blue tem a propriedade de aderir ou olhar para as estruturas que contêm quitina. As estruturas são tingidas de azul claro.

Deve -se notar que a parede celular dos microorganismos fúngicos, especialmente os moldes, contém quitina, e é por isso que esse corante é ideal para tingir esses microorganismos.

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Caracteristicas

A solução azul de lactofenol é uma coloração aquosa e fortemente ácida, aparência levemente nublada, cor azul claro. Permanece estável se estiver protegido entre 15 ° C e 25 ° C. A garrafa deve ser mantida adequadamente fechada. É irritante e corrosivo para as membranas de pele e mucosas.

Composição

A fórmula para preparar um litro de lactofenol azul é a seguinte:

-250 g/L de ácido lático

-1.0 g/l de azul de anilina ou azul de metila

-500 g/L de glicerina

-250 g/L de fenol

-250 ml de água desionizada ou destilada.

O fenol na água previamente curtida é dissolvido. Ácido lático e glicerina são adicionados e misture muito bem. Finalmente, a anilina azul se dissolve. Misture novamente e está pronto para uso.

As partes para preparar 80 ml de solução azul de lactofenol são:

-20 g cristais de fenol

-20 ml de ácido lático

-40 ml de glicerina ou glicerol

-20 ml de água destilada.

Usar

É usado para tingir estruturas fúngicas e, através das características morfológicas observadas no nível microscópico, para poder fazer um diagnóstico presumido do fungo.

Procedimento

Coloração de estruturas de culturas fúngicas

- Uma cultura pura do fungo é levada para a qual eles querem observar suas estruturas.

- Funciona preferencialmente em um sino de fluxo laminar, ou sob o isqueiro, usando tapping e luvas, pois é necessário o operador.

- Em um slide, uma gota de lactofenol azul é colocada.

- Um quadrado de fita adesiva de boa qualidade é cortado e atende cuidadosamente no final da alça de platina já esterilizada e fria.

- A alça de platina se aproxima da parte mais superficial da colônia fúngica e toca muito cuidadosamente a colheita, exatamente onde a pasta da fita adesiva está localizada.

- Em seguida, leva para o slide e colocado apenas na gota de lactofenol azul, tomando cuidado para que a fita seja perfeitamente estendida e lubrificada com o corante. Muito delicadamente, a alça de platina é removida.

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- Outra gota de lactofenol azul na fita é colocada e por cima. Não há muita pressão deve ser exercida para não destruir as estruturas de fungos, pois essas são extremamente frágeis. O corante deve ser deixado por aproximadamente 3 a 4 minutos.

- Após esse período, a preparação está pronta para ser observada em um microscópio de 10x ou 40x. Se for necessária uma observação 100x, o óleo de imersão deve ser usado.

- As estruturas de fungos geralmente são observadas em cor azul, exceto para fungos dematíacos que retêm sua cor marrom característica desse tipo de fungos.

Torno de amostras biológicas diretas

Se for necessária uma amostra biológica direta, como escarro, pus, exsudato, secreções, entre outros, eles precisam ter um procedimento prévio de descontaminação da amostra. A solução Naoh é usada para isso.

Em caso de amostras de cabelo, eles podem ser tingidos diretamente.

Vários cabelos afetados (10 no total) dos ferimentos presuntivos de Tña Capitis (áreas alopécicas) são tomadas e colocadas em um slide (3 a 4 cabelos por slide). Acima de algumas gotas de lactofenol azul e imediatamente coberto com uma tampa.

Pegue o slide com um grampo suavemente em um isqueiro. Para fazer isso, faça 3 a 4 passes rápidos para a chama. Olhe para o microscópio em 40x e procure esporos fora ou dentro do cabelo (ectothrix ou endothrix, respectivamente). Se necessário, coloque o óleo de imersão e observe em 100x.

Coloração germinativa do tubo na identificação de Candida Albicans

Depois de incubar a cultura presuntiva de Candida Albicans No soro humano por 2 a 4 horas a 37 ° C, uma parte da solução é tomada e manchada com lactofenol azul. A preparação é observada no microscópio 40x. O tubo germinativo está presente e os blastosporas são tingidos de azul brilhante.

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Folha de segurança de lacofenol

A Associação Nacional de Proteção contra Incêndios (NFPA) estabelece a folha de segurança de substâncias químicas sobre o risco de que ela representa de acordo com vários aspectos, eles simbolizam através de um rombus de cores e um número que vai de 0-4.

O risco à saúde é identificado em azul, inflamabilidade em vermelho, instabilidade ou reatividade amarela e algum perigo branco especial.

Saúde

O risco à saúde apresentado por lactofenol azul de acordo com a NFPA é o nível 3. Isso significa que a substância é extremamente perigosa quando ingerida ou está em contato direto com as membranas de pele ou mucosas.

É uma substância altamente corrosiva e irritante.

Quando o contato com a pele e as membranas mucosas causam queimaduras graves.

Se ingerido pode causar dor de cabeça, confusão, letargia, inconsciência, parada respiratória e até morte.

Inflamabilidade

De acordo com a NFPA, o lactofenol azul é classificado no nível 1 em termos de inflamabilidade. Isso significa que faz combustão apenas se for aquecido acima de 94 ° C.

Instabilidade

Catalogado de acordo com a NFPA no nível 0 (zero) em termos de reatividade. Isso significa que não tem risco de reatividade, ou seja, é uma substância quimicamente estável.

Perigos especiais

Não oferece riscos especiais adicionais.

Referências

1. Laboratório SAR. Lactofenol azul. 2010. Disponível em: Labsar.com.
2. Laboratório de Química Clínica Aplicada. Lactofenol azul. 2015. Disponível em: Cromakit.é
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