Agar Vogel-Johnson O que é, Fundação, Preparação, Usa

Ele Agar Vogel-Johnson É um meio de cultura sólida, seletiva e diferencial, especialmente formulada para o isolamento de Staphylococcus aureus. Este meio foi criado por Vogel e Johnson em 1960 a partir da modificação do ágar Telurito Glycina formulado em 1955 por Zebovitz, Evans e Niven.

A modificação consistiu em aumentar a concentração de manitol presente no ambiente e na incorporação de um indicador de pH. A fórmula atual é composta por triptena, extrato de levedura, manitol, fosfato de dipotássio, cloreto de lítio, glicina, vermelho fenol, ágar, solução de telurita de potássio a 1%.

Deve-se notar que existem outras mídias que, como o ágar Vogel-Johnson são seletivas para o isolamento de S. aureus, como Salty Manitol Agar e Baird Parker Agar. Nesse sentido, pode -se dizer que a fundação do Vogel - Johnson concorda é uma mistura entre o Agar Salty Manitol e o Agar Baird Parker.

Na primeira colônias de S. aureus Eles são distinguidos por fermentol. Por outro lado, no segundo S. aureus É caracterizado pela redução de Teluro para Teluro e formando colônias cinzas para preto. Ambas as propriedades são observadas no ágar Vogel-Johnson.

Este meio, como seus colegas, é útil para a detecção de Staphylococcus aureus Em amostras de alimentos, os controles de saúde de produtos industriais e em amostras clínicas.

Base

Contribuição de nutrientes

O meio de Vogel - Johnson contém extrato de triptein e levedura; Ambas as substâncias fornecem aminoácidos de cadeia longa que servem como fontes de carbono e nitrogênio necessárias para o crescimento bacteriano. As bactérias capazes de crescer neste meio levarão os nutrientes dessas substâncias.

Poder seletivo

O ágar Vogel - Johnson é capaz de inibir o crescimento de bactérias gram -negativas e até alguns gramas positivos, favorecendo o desenvolvimento de staphylococos positivos da coagulase. Substâncias inibidores são teluritas de potássio, cloreto de lítio e glicina.

Poder diferencial

As substâncias que fazem esse meio diferencial são manitol e telurita de potássio. Manitol é um carboidrato e, quando são produzidos ácidos fermentados que tornam o meio de vermelho para amarelo, o que acontece graças à presença do indicador de pH do pH vermelho.

Enquanto, a telurita incolor quando é reduzida a teluro livre metálico, leva uma cor cinza escura.

Ele Staphylococcus aureus fermenta o manitol e reduz o teluro para teluro. É por isso que as colônias típicas de S. aureus Neste meio, eles são cinza ou pretos cercados por um meio amarelo.

Bactérias que crescem neste meio e não reduzem a telurita ou fermentam o manitol, formarão colônias transparentes cercadas por um meio vermelho, ainda mais intenso que a cor original, devido à alcalinização do meio pelo uso de peptones.

Por outro.

Se o meio preparado sem a adição do telurito de potássio, as colônias de S. aureus Eles se desenvolveriam como colônias amarelas, cercadas por um meio amarelo, como acontece no ágar salgado de manitol.

Balanço Osmótico e Agente Solidificador

O fosfato de Dipotássio mantém o equilíbrio osmótico do meio e ajusta o pH à neutralidade 7.2. Enquanto o ágar dá consistência sólida ao meio de cultura.

Preparação

Solução de 1% de telurita de potássio P/V

Esta solução não está incluída no ambiente desidratado, porque não pode ser esterilizado em autoclave. Por esse motivo, é preparado separado e adicionado ao meio já esterilizado.

Algumas casas comerciais vendem a solução de telurita de potássio de 1% pronta para uso. Se você deseja se preparar em laboratório, prossiga da seguinte forma:

Pese 1.0 gr de telurita de potássio e medir 100 ml de água destilada. Dissolva a telurita do potássio em uma parte da água e depois complete a quantidade de água até atingir 100 ml. Esterilizar a solução pelo método de filtragem.

Base de ágar Vogel-Johnson

Pesar 60 gr em meio desidratado e dissolver em 1 litro de água destilada. A mistura é aquecida para ferver para ajudar a solução completa. Durante o processo de dissolução, o meio é agitado com frequência.

Esterilize em autoclave 15 libras de pressão e 121 ° C por 15 minutos. Remova da autoclave e deixe ficar até que o meio atinja uma temperatura aproximada de 45 a 50 ° C. Adicione 20 ml da solução de telurita de potássio previamente preparada a 1%.

Misture e despeje em placas estéreis de Petri. Deixe solidificar e pedir em uma placa invertida.

O pH final do meio preparado deve estar em 7,2 ± 0,2.

Antes de semear uma amostra, você deve esperar que a placa tome a temperatura do meio ambiente.

A cor do meio preparado é vermelho.

Usar

Embora possa ser usado para isolamento de S. aureus Em qualquer tipo de amostras, é usado principalmente para a análise microbiológica de produtos farmacêuticos, cosméticos e alimentos.

É recomendável que o inóculo seja denso. A semeadura pode ser feita para dar uma alça de platina ou pela superfície com drigalski spatula.

As placas são incubadas a 35-37 ° C por 24 a 48 horas em aerobiose.

Controle de qualidade

Para executar o controle de qualidade no ambiente Vogel-Johnson, você pode usar os seguintes controles de tensões:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 O Proteus mirabilis ATCC 43071.

O resultado esperado é o seguinte: para as cepas de S. aureus crescimento satisfatório com colônias negras cercadas por meio amarelo. Para S. epidermidis Crescimento regular com colônias translúcidas ou negras cercadas por meio vermelho.

Também para E. coli Espera -se que haja inibição total e para Proteus mirabilis inibição parcial ou total; Se crescer, fará isso dificilmente e as colônias serão pretas cercadas por meia cor vermelha.

Referências

1. BD Laboratories. VJ (Agar Vogel e Johnson). Disponível em: BD.com
2. Laboratórios da Britânia. Agar Vogel-Johnson. Disponível em: Britanialab.com