Agar triptych de soja

Ele Agar triptych de soja É um meio de cultura sólido, não seletivo e nutritivo. É designado com as letras tsa) eu sou ágar. É composto por tripta, peptona de soja, cloreto de sódio e ágar -gar.

Devido ao seu alto poder nutricional, é ideal para o cultivo de microorganismos moderadamente exigentes e que não exigem. O meio sem suplementos adicionais não é recomendado para culturas primárias, mas é muito útil para ascensão pura e mantê -las viáveis, entre outros usos.

Além disso, este ágar serve como base para a preparação de meios enriquecidos, como ágar de sangue, especialmente quando é necessário Streptococcus pneumoniae e Streptococcus pyogenes respectivamente.

Por outro lado, quando combinado com antibióticos, é útil para isolar microorganismos anaeróbicos opcionais e rigorosos de importância clínica de amostras com flora mista.

Finalmente, a composição da Agência de Soja Triptyse e seu desempenho atende às demandas estabelecidas pelos diferentes farmacopoeanos (europeu, japonês e norte -americano).

Base

Para o bom desenvolvimento de bactérias, é necessária a presença de contribuições energéticas, como aminoácidos, vitaminas, bases purificadas e pirimidia.

Nesse sentido, a tripta e a peptona da soja fornecem esses nutrientes aos microorganismos, permitindo assim todo o seu desenvolvimento. No entanto, para exigir bactérias, é necessário complementar esse sangue agibrado ou sangue aquecido para aumentar seu enriquecimento.

Por outro lado, se os antibióticos forem adicionados ao meio ambiente, ele se torna um meio seletivo. Você também pode adicionar 0.6 % de extrato de levedura para favorecer o isolamento de espécies do gênero Listeria, enquanto o agregado de Cistina Telurito e O sangue de cordeiro é ideal para Corynebacterium difteriae.

Finalmente, o cloreto de sódio fornece o equilíbrio osmótico médio e o ágar fornece consistência sólida.

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Preparação

Placas agrícolas de soja tríptica

Para preparar a Agrícola de Triptis de Soja, 40 gr de meio comercial desidratado devem ser ponderados em um equilíbrio digital. Ele se dissolve em um litro de água destilada contida em uma felola.

A mistura é deixada em repouso por 5 minutos e, posteriormente, leva uma fonte de calor para ajudar a dissolução média. Deve ser agitado com frequência e ferver por 1 ou 2 minutos. Posteriormente, o meio é esterilizado na autoclave a 121 ° C por 15 minutos.

Vamos esfriar até 50 ° C e distribuir em placas estéreis de Petri. Deixe solidificar, investir, encomendar em plaquetas e salvar na geladeira.

O pH final do meio deve estar em 7,3 ± 0,2.

Deve -se levar em consideração que a cor da cultura desidratada é clara e deve ser armazenada entre 10 e 35 ° C, em um local seco.

Por sua vez, o ágar preparado é âmbar leve. As placas preparadas devem ser armazenadas na geladeira (2 a 8 ° C) até o uso.

As placas devem atingir a temperatura ambiente antes de serem usadas.

Placas de agentes tripatizados de soja suplementada com sangue

O ágar de sangue está preparando 5% de sangue desfibrinado ao resfriar o ágar tríptico de soja a 50 ° C. A mistura é homogeinizada girando com movimentos suaves.

Sirva em placas estéreis de Petri. A cor do meio deve ser cereja vermelha.

Placas de triplo suplementado com soja com sangue aquecido

Para preparar o ágar de sangue com TSA, os procedimentos já descritos, mas ao sair da autoclave, é permitido ficar até que a temperatura do meio esteja aproximadamente entre 56 e 70 ° C. Naquela época, o sangue é colocado e misturado até que o meio gire a cor marrom.

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Sirva em placas estéreis de Petri. A cor do meio é marrom marrom.

Cunhas de Soy Triptica Agrrica

O procedimento de preparação do ágar é igual ao descrito para as placas, com a diferença de que, em vez de servir o meio em placas de Petri, é distribuído entre 10 e 12 ml em tubos com tampa de baquelita antes de esterilizar.

Posteriormente, os tubos são autoclavados a 121 ° C por 15 minutos. Ao sair, eles se inclinam com a ajuda de um apoio e se solidificar.

As cunhas preparadas são semeadas pela superfície e servem para manter certos microorganismos viáveis ​​que não têm que servir, por um determinado momento.

Formulários

O ágar tríptico de soja é usado nos seguintes casos:

-Como base para a preparação do ágar clássico de sangue usado na rotina na maioria dos laboratórios.

-Isolamento de bactérias exigentes.

-Observação do padrão de hemólise.

-Execução de testes de diagnóstico.

-Como base para preparar sangue especial para Corynebacterium difteriae, Com Telurito Cistina e sangue de cordeiro.

-Como base para a preparação de sangue de cordeiro, mais canamicina-vancomicina para crescimento anaeróbico, especialmente Bacteroides sp.

-Para manutenção de cepas não compensadoras (Bacteroteca).

-Contagem microbiana aeróbica no estudo de limite microbiano de amostras de água, meio ambiente, alimentos e cosméticos.

Semeado

As amostras podem ser semeadas diretamente na superfície da soja -ágar tríptico suplementado com sangue ou outros aditivos. É semeado com exaustão.

Enquanto, as placas de ágar tríptico de soja sem soja são geralmente usadas para aumentar as cepas microbianas (bactérias ou leveduras).

Controle de qualidade

Controle de esterilidade

Para verificar a esterilidade dos diferentes meios preparados com a soja tripicasena -grão, é recomendável. Em todos os casos, deve permanecer sem crescimento.

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Se a contaminação for verificada, o lote completo deve ser descartado.

Controle de crescimento

Para estudar o funcionamento adequado do ágar tríptico de soja, as seguintes cepas bacterianas podem ser usadas: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 e Enterococcus faecalis ATCC 29212.

As cepas são semeadas e incubadas em aerobiose a 37 ° C por 24 horas.

Em todos os casos, o crescimento deve ser satisfatório.

Você também pode usar fungos como complexo Candida Albicans ATCC 10231 e Aspergillus niger ATCC 16404. Um bom crescimento é esperado para ambas as cepas.

Controle de crescimento e padrão de hemólise do ágar tríptico suplementado pela soja com sangue

Para verificar o funcionamento adequado do ágar de sangue preparado com esta base, você pode usar as seguintes cepas: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 e Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Eles são semeados e incubados a 37 ° C em microaerofilia por 24 horas.

Em todos os casos, o crescimento deve ser satisfatório, levando em consideração que em S. Pyogenes Beta-hemólise (halo claro ao redor da colônia) e em ambas as cepas de S. pneumoniae Hemólise alfa (halo esverdeado ao redor das colônias) deve ser observado.

Referências

1. Agar Tripteinna SOA. Disponível em: Britanialab.com
2. Agar de soja tríptico. Disponível em: FoodSafety.Neogen.com