Salt e manitol de ágar o que é, fundamento, preparação, usa

Ele Gank Sal e Manitol o Salado manitol é um meio de cultura sólido, seletivo e diferencial. Foi criado por Chapman para o isolamento de patógenos gram -positivos, especialmente Staphylococcus aureus.

No entanto, também é útil isolar Staphylococus epidermidis, que às vezes pode estar presente como um patógeno oportunista, e Staphylococcus saprophyticus, patógeno urinário reconhecido, entre outras espécies.

PARA. Fiola com Salitol Salado preparou a cabeça. B. Placas de ágar de Salado Manitol plantadas com fermentação e não -fermentária cepas bacterianas de manitol. Fonte: A e B: Fotos tiradas pelo autor MSC. Marielsa Gil.

Alguns enterococos são capazes de crescer neste meio, bem como em certos formuladores de esporos positivos de bacilos de grama.

Este meio é muito útil na análise de amostras clínicas, mas também é usado no estudo microbiológico dos alimentos e no controle de qualidade de produtos industriais, como cosméticos, medicamentos, entre outros.

O ágar salgado de manitol é composto de extratos e peptonos de carne bovina, tripta, manitol, cloreto de sódio, fenol vermelho e ágar e ágar.

Base

Agar de manitol é seletivo graças à alta concentração de sal que tem. A salinidade atua como uma substância inibitória e impede o crescimento de bactérias gram -negativas.

Também é diferencial devido à presença de carboidratos de manitol e ao indicador de pH vermelho. A partir disso, as bactérias capazes de fermentar o manitol produzem ácidos, acidificando o meio, girando as colônias e o meio amarelo.

Por outro lado, as colônias que não fermentam manitol crescem no meio, levando os nutrientes que lhes fornecem os extratos e peptonos de carne e tripta. A partir daí, extraem carbono, nitrogênio, vitaminas e minerais necessários para o crescimento.

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As colônias neste caso podem ser fracas ou fortes rosa, e o meio permanece da mesma cor ou mudanças na fúcsia.

O ágar é a substância que fornece a consistência ao meio ambiente.

Preparação

Para preparar um litro de ágar salgado de manitol, 111 gr do meio desidratado da casa comercial de preferência e se dissolve em 1000 ml de água destilada, usando uma correção.

O calor é aplicado frequentemente mexendo os meios para melhorar o processo de dissolução. É fervido por um minuto.

A fixola é colocada na autoclave a 121 ° C por 15 minutos.

Depois que o tempo termina, o Autoclave Fixola é removido, deixe de pé e sirva entre 15 a 20 ml em placas estéreis de Petri quando a temperatura for de aproximadamente 50 a 55 ° C.

É permitido solidificar, pedindo de uma maneira invertida nas plaquetas e mantendo na geladeira até o seu uso. Antes de semear uma amostra, você deve esperar a placa tomar a temperatura do meio ambiente.

As placas são semeadas por estriaticação ou por superfície plantada com drigalski spatula. O pH final do meio preparado deve estar em 7,4 ± 0,2

A cor do meio desidratado é bege leve e a cor do meio preparado é laranja vermelha.

Formulários

Devido à sua alta seletividade, este meio é ideal para semear amostras com flora mista, na qual você deseja procurar a presença de Staphylococus aureus, como o principal patógeno deste gênero.

Nesse sentido, um de seus usos mais frequentes está na análise microbiológica de amostras de exsudatos faringeais e secreção nasal, especialmente para detectar portadores assintomáticos de S. aureus.

Alguns países implementaram essa análise como um requisito obrigatório para pessoas que desejam trabalhar como venadores de alimentos.

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Este controle impede as pessoas de carregar S. aureus, evitando assim que existem envenenamentos alimentares maciços, Devido ao consumo de alimentos contaminados com enterotoxina estafilocócica.

Também pode ser incluído no plantio de infecções de feridas, culturas de sangue, LCR, lavagem de bronch alveolares, entre outros.

O ágar salgado de manitol é útil para colônias de uroculturas reiislares de ágar ou ágar de sangue cujo grama revelou cocos de grama positivos em aglomerados.

Também é válido na análise microbiológica de alimentos, água potável, solos, entre outras aplicações.

Controle de qualidade

Depois que um boom com ágar salgado de manitol é preparado, é aconselhável realizar controle de qualidade. Os controles são semeados para mostrar se há ou não crescimento deles.

Como controle positivo, você pode usar cepas conhecidas de Staphylococcus aureus. Deve crescer satisfatoriamente em desenvolvimento de colônias amarelas, e o meio também se torna a mesma cor.

Da mesma forma, é conveniente incluir uma tensão conhecida de Staphylococcus epidermidis. Deve crescer satisfatoriamente em desenvolvimento colônias rosa, e as médias permanecem da mesma cor ou escurecem em um rosa mais forte.

Como controle negativo, cepas que não devem crescer neste meio são usadas. Por exemplo, você pode semear uma tensão conhecida de Escherichia coli ou Klebsiella pneumoniae. O resultado esperado é uma inibição completa, ou seja, sem crescimento.

Além disso, uma placa sem inocular deve ser incubada. Não deve haver crescimento ou mudança de cor.

É importante que a placa não seja usada se houver indicações de deterioração, como poluição, desidratação, descoloração, entre outros.

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Considerações finais

Ao usar o meio de manitol salgado, alguns aspectos importantes devem ser levados em consideração:

-Obter um crescimento de colônias amarelas não indica que é Staphylococcus aureus. Lembre -se de que algumas cepas de Enterococcus são capazes de crescer neste meio e fermentando manitol, bem como certos bacilos grama positivos.

Portanto, é importante fazer um grama para a colônia e um teste de catalase.

-Por outro lado, devemos considerar outras espécies de Staphylococcus diferentes de aureus Eles também são capazes de fermentar o manitol. Portanto, é importante subcultural a colônia a um caldo de nutriente para tirar a partir daí e realizar o teste de coagulase.

Entre as espécies de Staphylococcus de importância clínica para o homem que fermment manitol estão: S. aureus, s. Simulans, s. Capitis ssp capitis, s. capitis ssp urealyticus, s. Xylosus, s. Cohnii ssp urealyticum, entre outros.

Outros podem dar reação variável, isto é, às vezes positiva e às vezes negativa. Alguns são S. Saprophyticus, s. Haemolyticus, s. Warneri, s. Intermediário, entre outras.

-Não é recomendável tirar colônias diretamente do ágar Manitol para realizar o teste de coagulase, uma vez que a alta concentração de sal do meio pode interferir no resultado.

-Finalmente, é recomendado S. aureus Eles podem fermentar lentamente o manitol, embora isso não seja muito frequente.

Referências

1. Laboratórios da Britânia. Agar Salado Manitol. 2015. Disponível em: Britanialab.com
2. BD Laboratories. BD Manitol Sal Agar. 2013. Disponível em: BD.com.