Agar Salmonella-Shigella

Ele Agar Salmonella-Shigella Também conhecido como Agar SS, é um meio moderadamente seletivo e diferencial, especialmente projetado para o isolamento de bactérias enteropatogênicas dos gêneros Salmonella e Shigella, ambos de amostras ambientais e clínicas.

O ágar SS tem uma composição complexa; Consiste em extrato de carne, peptona, lactose, sais biliares, citrato de sódio, tiossulfato de sódio, citrato férrico, ágar, vermelho neutro, verde brilhante e água destilada. Dada sua grande seletividade, as amostras podem ser semeadas com uma flora mista abundante.

Agar SS com colônias de Salmonella SP. Fonte: manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenças/BY-SA/4.0)], da Wikimedia Commons

Nos laboratórios de microbiologia, o meio Salmonella-Shigella é amplamente usado para investigar a presença de Salmonella e Shigella em amostras de fezes diarréicas, águas residuais, água potável e alimentos.

Às vezes é necessário usar caldos pré-enriquecer (caldo Lactosado) e enriquecimento (caldo de selenito cistina) para recuperar as tensões de Salmonella.

Essas etapas são necessárias quando a existência de Salmonella é suspeita em quantidade muito baixa, ou onde a tensão pode ser maltratada por processos de produção industrial, principalmente alimentos processados. Também é aconselhável enriquecer amostras de fezes de pacientes que foram tratados com antibióticos.

Posteriormente, o caldo enriquecido pode ser semeado no ágar Salmonella-Shigella e em outros meios semelhantes, como o Agar Xilosa, Lysina DeSoxicolate (XLD) e Agar Hektoen enteric (He).

Base

Cada componente da cultura Salmonella-Shigella tem uma função específica, e a mistura como um todo fornece as propriedades que a caracterizam.

Poder nutricional

O extrato de carne e peptona (digerido com tecido animal) fornecem os nutrientes necessários (nitrogênios, carbono e vitaminas) para o desenvolvimento de microorganismos capazes de tolerar o restante dos componentes.

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Consistência

O ágar -gar é responsável por fornecer consistência sólida ao meio ambiente.

Seletivo

Este meio é altamente seletivo porque contém sais biliares, citrato de sódio e verde brilhante. Portanto, inibe o crescimento de todas.

Enquanto as bactérias do gênero Salmonella e algumas cepas de Shigella se elas apoiarem esses compostos.

Principalmente, o gênero Salmonella é muito resistente a sais biliares, tanto que eles são capazes de viver na vesícula biliar de alguns pacientes transportadores que constantemente expulsa as bactérias pelas fezes.

Diferencial

Lactose é carboidrato fermentável que ajuda. Esta propriedade é evidenciada pela presença do indicador de pH, que neste meio é o vermelho do fenol.

As cepas de fermentação de lactose dão colônias vermelhas, enquanto não -fermentação são incolores. Esse recurso é importante, já que Salmonella e Shigella não ferram lactose.

Por outro lado, esse meio contém tiossulfato de sódio como fonte de sulfeto e citrato férrico como fonte de ferro. Ambos os compostos conseguem diferenciar bactérias capazes de produzir sulfeto de hidrogênio. Eles reagem para formar um precipitado negro de sulfeto férrico insolúvel e visível.

Esta propriedade tem algumas cepas do gênero Salmonella. Normalmente suas colônias são incolores com um ponto preto no centro do mesmo. O restante dos salmonelas não produz h₂E se desenvolve como colônias incolores.

Por outro lado, as colônias do gênero Shigella são incolores sem escurecimento.

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Preparação

Este meio é muito simples de preparar.

Pese 63 gr de meio comercial desidratado e se dissolve em um litro de água destilada. Aqueça a solução e agite.  A mistura pode chegar à ebulição por minutos por minutos.

Este meio não deve ser autoclavado. Após sua dissolução, é usado diretamente em placas estéreis simples ou duplas.

Ao solidificar, eles são ordenados de maneira invertida nas plaquetas e são armazenados na geladeira (2-8 ° C) até o uso.

O meio após preparado deve estar em pH 7,2 ± 0.2 e com vermelho laranja.

É importante deixar as placas modelarem antes de semear as amostras. A amostra original pode ser semeada diretamente, baixando material em uma parte do ágar e depois a partir daí para se esforçar por exaustão.

Em caso de usar caldos enriquecidos, passando uma parte do caldo de selenito e semeando com drigalski spatula.

37 ° C é incubado por 24 horas em aerobiose.

Lembre -se de que a quantidade de gramas, apesar do pH final do meio, pode variar de uma casa comercial para outra. O mal médio sempre traz as indicações para sua preparação.

Usar

É frequentemente usado na análise de copradeiras e no estudo microbiológico de amostras de águas residuais, águas de consumo e alimentos.

Placas duplas frequentemente são preparadas, de um lado o ágar Salmonella-Shigella é colocado e no outro ágar XLD.

Limitações

-Algumas cepas de Shigella não crescem neste meio. Portanto, não é recomendado para o isolamento primário desse gênero.

-Nem toda colônia transparente com centro preto é indicativo de Salmonella; Testes bioquímicos devem ser realizados para fazer uma identificação correta, uma vez que as colônias de algumas cepas de proteínas são indistinguíveis das de Salmonella.

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-O meio desidratado deve cuidar da exposição ao meio ambiente, pois é muito higroscópico. Portanto, deve ser mantido em um ambiente seco e bem fechado. Aberto por períodos muito curtos.

-Com o tempo, os sais biliares do meio podem precipitar, formando uma imagem semelhante a um emaranhado dentro do ágar, mas isso não afeta os resultados.

-Algumas cepas de Shigella podem fermentar lentamente a lactose.

Controle de qualidade

Para provar que o meio está funcionando corretamente, é aconselhável.

Para isso, você pode usar cepas de E. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella Flexneri, Salmonella Typhimurium qualquer Enterococcus faecalis.

Os resultados esperados são:

Escherichia coli --Colônias convexas rosa.

Enterobacter e Klebsiella- Grandes colônias e mucoides vermelhos ou rosa.

Shigella Flexneri --colônias planas planas ou incolores.

Salmonella typhimurium - colônias incolores com centro preto.

Enterococcus faecalis-- Inibição total.

Referências

1. Difcco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Agar Salmonella-Shigella. Disponível em: F-Soria.é
2. BD Laboratory. Agar BD Salmonella-Shigella. Disponível em: BD.com