Bilis Agarc

Ele BILIS AGULINA É um meio de cultura sólido seletivo e diferencial. É usado como um teste de diagnóstico para determinar a capacidade de um certo microorganismo de crescer em um meio que contém bile e também decompondo a escultina de glicosídeo em escultina e glicose.

Este teste de diagnóstico é usado para diferenciar espécies do gênero Streptococcus pertencente ao Grupo D (Bile de Escultura Positiva), de outros grupos Streptococcus que reagem negativamente na frente deste teste.

Bilis Bilis Plate, sembalada com uma cepa Enterococcus (teste positivo). Fonte: nenhum autor legível por máquina fornecido. Philippinjl assumiu (com base em reivindicações de direitos autorais). [Domínio público]

Deve -se notar que algum grupo Streptococcus do Grupo Viridans pode hidrolyz.

Por outro lado, a bile média também é útil para o diagnóstico de Listeria monocytogenes ou espécie de Aerococcus sp, Como esses microorganismos são bile de escultura positivos.

O ágar biliar de escultura é composto de peptona, extrato de carne, bile de boi, escultura, citrato de ferro, ágar e água destilada. Algumas casas comerciais incluem azida de sódio dentro da composição do meio.

O meio pode ser preparado em laboratório se você tiver todos os compostos separadamente ou pode ser preparado a partir do ambiente desidratado comercial.

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Base

O meio Sculpton contém peptonos e extrato de carne, ambos os compostos fornecem as substâncias nutricionais necessárias para o crescimento de microorganismos.

Ele também contém Sculline; Este composto é um lado glucó formado pela união de um monossacarídeo simples (glicose) com um composto chamado 6.7-di-hidroximarina ou scupply (agluconon), juntamente com um vínculo acetal ou glucosídico.

O teste é baseado em demonstrar se as bactérias são capazes de hidrolyz. Se isso ocorrer, a escultura é dividida em escupos e glicose. A esculetina reage com o ferro presente no meio, formando um composto marrom escuro, quase preto.

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Isso significa que o citrato férrico atua como um desenvolvedor de reação. Este recurso faz do ágar biliar de escultura um meio diferencial.

Por outro lado, a bile é um inibidor que impede o crescimento de alguns microorganismos; portanto, as bactérias antes de desdobrar Sculline devem ser capazes de crescer na presença de bílis. Portanto, este meio é considerado seletivo.

As bactérias que podem se desenvolver nesse ambiente são principalmente aquelas que vivem no ambiente intestinal.

Nesse sentido, algumas casas comerciais contribuem para o meio azid de sódio para inibir adicionalmente o crescimento de bacilos gram -negativos, aumentando a seletividade do meio para o crescimento de Streptococcus.

Finalmente, o ágar dá a consistência sólida ao meio ambiente e a água é o solvente dos compostos.

Preparação

Preparação de escultura biliar caseira

Pesar:

5 g de peptones

3 g de extrato de carne

40 g de bile de boi

1 g de escultura

0,5 gr de citrato de ferro

15 g de ágar

1000 ml de água destilada

Em caso de adição de sódio azid.

Dissolver os componentes no litro de água destilada, aqueça até que os compostos se dissolvem em sua totalidade. Distribua 5 ml em tubos de teste com tampa de rosca de 16 x 125 mm. Autoclavar a 121 ° C, 15 libras por 15 minutos.

Retire da autoclave e incline os tubos em um suporte, para que o ágar solidifique em um amplo pico de flauta.

Mantenha na geladeira até usar. Traga à temperatura ambiente antes de semear.

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Você também pode preparar placas de escultura biliar; Nesse caso, toda a mistura é autoclava em uma felola e posteriormente distribuída em placas estéreis de Petri. Eles se solidificaram e mantêm na geladeira.

O pH médio deve ser 6.6 ± 0,2.

Preparação da Bilis Aculina de uma mídia comercial

Pesar a quantidade especificada pela inserção. Isso pode variar de uma casa comercial para outra. Posteriormente, prossiga igual ao procedimento explicado acima.

O pH médio deve ser de 6,6 ± 0,2. A cor do meio desidratado é o bege claro e o meio preparado é âmbar escuro.

Sculta comercial de meia bile. Fonte: Foto tirada pelo autor do MSC. Marielsa Gil.

Formulários

O meio escultico é usado principalmente para diferenciar o Streptococcus do Grupo D (bile de escultura positiva), do resto dos grupos Streptococcus (bile de escultura negativa).

Se o teste de crescimento for combinado em caldo hipersalizado com o teste da bile de escultura, a identificação de um grupo de Streptococcus especial do Grupo D chamado Enterococcus pode ser identificado.

Este grupo de Streptococcus especial pertence ao grupo D do gênero mencionado e é capaz de hidrolyz 6,5%de sódio), propriedade que faz a diferença.

Portanto, o Streptococcus que Hydrolyz.

Semeado

Inocular o meio de preferência de um caldo puro de 24 horas de Todd-Hewitt.

Adicione 2 gotas na superfície média com uma pipeta pasteur e estenda -se no meio com uma alça de platina.

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Incubar a 35 ° C por 48 horas, enquanto o tempo de incubação é cumprido, pode ser monitorado para ver se há uma reação positiva. Se, no final dos tempos, a reação permanecer negativa puder ser incubada até a conclusão de 72 horas.

Interpretação

Reação positiva: Aparência de uma cor marrom escura, quase preta no pico da flauta (no caso do teste do tubo) ou escurecimento do ágar ao redor das colônias (no caso do teste da placa).

Reação negativa: Não há escurecimento do meio ou há a aparência de cor preta em menos da metade do tubo após 72 horas de incubação. Por outro lado, o crescimento bacteriano no meio sem a aparência da cor preta deve ser considerada um teste negativo.

Controle de qualidade

Para avaliar a qualidade do meio, uma tensão de Enterococcus faecalis ATCC 29212 como um controle positivo e uma cepa estreptocococada que não pertence ao Grupo D como um controle negativo.

Limitações

-A mídia que não contém azida de sódio permite o crescimento de bacilos grama negativos. Alguns deles podem Blacke o meio.

- Algumas casas comerciais adicionam baixa concentração biliar (10%) e, por esse motivo.

Referências

1. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. 5ª ed. Pan -American Editorial S.PARA. Argentina.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnóstico microbiológico de Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.PARA. Argentina.
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5. "Agar de escultura de Bilis." Wikipedia, enciclopédia livre. 22 de agosto de 17:30 UTC. 22 de abril de 2019, 17:35. é.Wikipedia.org.
6. BD Laboratories. Bile Eculin Agar Slants. 2015. Disponível em: BD.com
7. Laboratórios Neogen. BILIS AGULINA. Disponível em: FoodSafety.Neogen.com