Bhi Agar O que é, fundamento, preparação, usa

Ele Agar Bhi o Brain Heart Infusion. É um meio de cultura sólido nutritivo. Em espanhol, nos referimos a ele como um ágar de infusão cerebro coração. É um meio de cultura não -seletivo, o que significa que todos os tipos de bactérias grama positivas e grama podem ser desenvolvidas, bem como alguns fungos filamentosos e fungos filamentosos.

É composto de infusão cerebral e coração de vitela, Hydrolyz peptática de Tentue Animal.

Deve -se notar que o ágar BHI é um dos meios de cultura mais frequentes em laboratórios de bacteriologia. Pode ser usado sem suplementos como primário, subjetivo de colônias obtidas em outros meios seletivos ou para a manutenção de cepas no laboratório.

Por outro lado, é um meio ideal para ser usado como base na preparação de meios enriquecidos, como ágar de sangue e ágar de chocolate. Ambos os ideais para isolar microorganismos exigentes do ponto de vista nutricional. No entanto, deve -se levar em consideração que, pois contém glicose, não é adequado para observar padrões de hemólise.

Da mesma forma, o ágar BHI pode ser usado para a preparação de meios especiais para o isolamento de microorganismos patogênicos de difícil crescimento nos meios comuns, incluindo: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium difteriae e Histoplasma capsulatum.

Com o aditivo antibiótico, o ágar BHI se torna um meio seletivo para isolamento de fungos.

Base

É um meio de cultura nutritivo para isolar microorganismos moderadamente exigentes, sendo capaz de aumentar seu enriquecimento com a adição de sangue e outros suplementos nutritivos.

É um meio de cultura não seletivo, portanto permite o crescimento de bactérias mais positivas e gram -negativas, bem como alguns fungos. No entanto, pode se tornar seletivo com a adição de antibióticos.

O meio contém infusão de coração cerebral e vitela, tecido animal hidrolisado e tecido de caseína pancreática hidrolisada; Todos esses compostos atuam como fontes de vitaminas, aminoácidos, nitrogênio e carbono.

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A glicose é um carboidrato que fornece energia aos microorganismos quando o fermentar. Enquanto o cloreto de sódio e fosfato de dissódio mantêm o equilíbrio osmótico e fornecem um pH próximo à neutralidade. Finalmente, o ágar dá consistência sólida ao meio ambiente.

Preparação

Pesa 52 gramas do meio desidratado e se dissolve em um litro de água destilada. Leve a mistura para uma fonte de calor até ferver, agitando frequentemente durante o processo de dissolução.

Você pode preparar cunhas ou placas de ágar BHI sem aditivos.

Cunhas

Para a preparação de cunha, sirva a preparação até que encham em metade de cada tubo, tampe e esterilize em autoclave a 121 ° C por 15 minutos, quando estiver indo para a cama na base até que se solidifiquem. Posteriormente, mantenha na geladeira até usar.

BHI Wedges for Bacteroteca. Fonte: Foto tirada pelo autor do MSC. Marielsa Gil.

Pratos

A mistura dissolvida é autoclava a 121 ° C por 15 minutos, quando sai, é permitido esfriar até 50 ° C e são servidos 20 ml do meio em placas estéreis de Petri. Eles podem solidificar, investir e armazenados em uma geladeira até que usem. Deixe as placas tomarem temperatura ambiente antes de semear.

O pH médio deve ser de 7,4 ± 0,2.

O meio despreparado é bege e preparado é âmbar leve.

Ágar de sangue

Depois de esterilizar o meio, esfrie até uma temperatura aproximada de 45 a 50 ° C, naquele momento adicione o sangue (50 ml), misture suavemente para homogeneizar e sirva 20 ml em cada placa de Petri. Se as bolhas forem formadas no prato, a chama mais clara nas bolhas para removê -las deve ser passada rapidamente.

Da mesma forma, a mídia especial pode ser preparada adicionando os aditivos correspondentes quando a mistura atingir a temperatura de 45 a 50 ° C.

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O meio é vermelho cereja.

Formulários

Use sem suplementos

O ágar BHI sem aditivos é útil como cultivo primário e semear cepas puras de microorganismos pouco ou moderadamente exigentes para sua identificação subsequente.

Como é um meio de cor clara, é ideal para a observação de pigmentos e também por não conter substâncias interferenciais, alguns testes bioquímicos, como oxidase e catalase, ou montar outros testes bioquímicos de colônias deste ágar.

Da mesma forma, o ágar bhi é largo.

As placas ou cunhas plantadas pela superfície com cepas bacterianas são incubadas a 37 ° C por 24 a 48 horas. Enquanto, em fungos, a temperatura e o tempo de incubação dependerão do tipo de fungo que é procurado.

Como ágar base para a preparação de outras mídias

Com esta base, você pode preparar mídia enriquecida e seletiva.

Enriquecido

Sua principal função é servir como base na preparação do sangue de rotina em laboratórios de microbiologia. Especialmente, a base do BHI é propícia ao isolamento de cepas de Streptococcus sp. No entanto, tem a inconveniência de não ser adequado para a observação dos padrões de hemólise, contendo glicose.

Também é usado na preparação de sangue de coelho ou cavalo Haemophilus sp. Para melhores resultados, você pode adicionar um suplemento de enriquecimento (Isavalex).

Se as amostras vieram do trato respiratório para o ágar, a bacitracina poderá ser adicionada para inibir a flora que o acompanha e aumentar a probabilidade de recuperação das cepas das cepas de Haemophilus sp.

Por outro lado, você pode preparar sangue (cordeiro ou humano) com Cistina Tellurito para isolar Corynebacterium diftheriae. Da mesma forma, é útil para preparar sangue de coelho, com o agregado de cistina e glicose para o isolamento de Francisella tularensis.

A semeadura de placas de ágar no sangue é feita por exaustão e incubada a 35-37 ° C por 24-48 horas em microaerofilia (5-10% de CO₂).

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Seletivo

Este meio com o agregado de antibióticos pode substituir o ágar Sabouraud por isolamento de fungos.

O ágar BHI combinado com cloranfenicol - gentamicina ou penicilina -, estreptomicina e sangue de cavalo é ideal para isolamento de Histoplasma capsulatum.

Dependendo do microorganismo que se procure isolar a incubação a 35-37 ° C ou à temperatura ambiente em aerobiose. Às vezes, é necessária incubação em ambas as faixas de temperatura, usando 2 placas para este.

Alguns fungos gostam Trichophyton Mentagrophytes Eles devem ser incubados à temperatura ambiente por até 7 dias.

Controle de qualidade

De cada lote preparado, é recomendável incubar 1 placa ou cunha a 37 ° C por 24 horas e verifique se não há crescimento; Especialmente é importante ao preparar sangue, porque é um meio facilmente contaminável.

Por outro.

Nesse sentido, para avaliar o ágar BHI sem aditivos, você pode usar cepas de Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 O Candida Albicans ATCC 10231. 37 ° C são incubados em aerobiose por 24 a 48 horas. Em todos os casos, o crescimento satisfatório é esperado.

Para avaliar placas de ágar no sangue, você pode semear cepas de  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 ou Trichophyton Mentagrophytes ATCC 9533.

As cepas bacterianas são incubadas a 37 ° C em microaerofilia por 24 horas, enquanto o fungo incuba à temperatura ambiente em câmara úmida de até 7 dias. Em todos os casos, o crescimento satisfatório é esperado.

Referências

1. Laboratórios da Britânia. Ágar de infusão de coração cerebral. Disponível em: Britanialab.com.
2. BD Laboratories. Agar Infusão do Coração Cérebro (BHI). Disponível em: BD.com.