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Ele óleo de imersão É um líquido viscoso e transparente que possui um alto índice de refração. Por esse motivo, é amplamente utilizado em observações microscópicas, pois fornece a propriedade de concentrar a luz quando passa pelo alvo 100x do microscópio, aumentando sua potência de resolução.

Isso ocorre porque um filme viscoso é formado entre o alvo e o mancha, impedindo que os raios de luz se dispersam quando atingem o ar, concentrando os feixes de luz em direção à amostra.

GOTERO com óleo de imersão e microscópio focado com alvo 100x usando óleo de imersão. Fonte: Pixabay.com

O óleo de imersão é usado apenas com o alvo 100x. É por isso que o objetivo de 100x também é chamado de objetivo de imersão. O resto é conhecido como objetivos secos. Este objetivo não pode ser usado sem óleo de imersão, porque sem essa visualização não seria satisfatória.

A principal função do óleo de imersão é fornecer imagens mais claras, claras e definidas, permitindo a observação de detalhes que não seriam possíveis com outros objetivos.

O primeiro óleo usado para esse fim foi o óleo de anis, usado ao lado da primeira lente de imersão criada por Giovanni Battista Amici. Isso apenas evitou a aberração cromática, mas não aumentou a abertura numérica do sistema de lentes.

Em seguida, o óleo de cedro foi usado, mas apresentou muitas desvantagens que forçaram seu desuso. Entre eles estava sua alta acidez, que danificou os objetivos em um curto prazo.

Posteriormente, outras substâncias como água e glicerina foram usadas até que os óleos de imersão sintética fossem criados, que foram gradualmente aperfeiçoados até chegarem ao óleo de imersão atual, que é um complexo composto de substâncias orgânicas.

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Composição do óleo de imersão

O óleo de imersão é constituído por uma mistura de compostos orgânicos como: terfenil, terfenil hidrogenado, hidrocarbonetos naturais e polibetações.

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Características do óleo de imersão

O óleo de imersão é um líquido amarelo claro, aparência ligeiramente viscosa, cheiro característico e densidade entre 0,92 a 0,99 gr/cm³.

Óleo de imersão Não é solúvel em água e tem um ponto de ebulição de 340 ° C. O índice de refração A (No. 20 ° C/D): oscila entre 1.482 - 1.516. Enquanto o índice de inflamação é de 110 ° C e a viscosidade varia entre 100 a 120 MPa.s.

Este produto deve ser descartado adequadamente, pois é ecotóxico. Isto é, é prejudicial ao meio ambiente, afetando principalmente animais aquáticos. Por outro lado, é a pele irritante e as membranas mucosas. Se ingerido é nefrotóxico e cardiotóxico.

O óleo de imersão é estável a 15 a 25 ° C, temperatura na qual deve ser mantido.

Fundamentos do óleo de imersão

Ao usar o aumento mais alto, a intensidade da luz deve ser aumentada. No entanto, muitas das vigas de luz estão perdidas porque são dispersas quando atingem o ar (espaço entre as cobertas e as lentes), e até alguns raios sofrem uma reflexão total.

O óleo de imersão tem um índice de refração semelhante ao de vidro. Portanto, quando o óleo entre a lente 100x e a cobertura, as vigas de luz são contatadas, as luzes estão concentradas.

Os raios concentrados cruzam a amostra e aumentam a nitidez da imagem, ou seja, a abertura numérica do objetivo aumenta e corrige aberrações cromáticas e esféricas.

Usos ou aplicativos

O uso do óleo de imersão é especialmente necessário quando é necessário observar uma imagem de uma maneira mais ampla, usando o objetivo de maior aumento (objetivo 100x) e, portanto, ser capaz de ver detalhes essenciais para estabelecer um diagnóstico.

Portanto, é amplamente utilizado em estudos microscópicos de várias áreas como: histologia, citolologia, hematologia e bacteriologia. Por exemplo, é útil para o estudo das características das células e tecidos de um paciente.

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Também serve para a análise do mancha de sangue, onde queremos.

Geralmente é usado em preparativos fixos, pois não é recomendado em novos preparativos. Isso ocorre porque a tensão superficial do óleo faz com que as coberturas se movam, que se origina que a amostra se move durante sua observação e impede sua análise.

Por outro lado, o óleo de imersão não é apenas útil na microscopia óptica convencional: também é usado em microscópios de fluorescência da reflexão interna total (TIRFM) e em aplicações confocais de fluorescência.

Passos para observar uma preparação usando óleo de imersão

Para ver uma preparação do microscópio, a preparação deve primeiro ser focada com o objetivo de menos aumento, geralmente o 10x, com pouca intensidade da luz.

Então vai para o alvo de 40x, e a passagem da luz é ligeiramente aumentada. Algumas análises podem ser realizadas com esse aumento, mas para ver detalhes estruturais, o aumento de 100x é necessário.

Antes de passar para o alvo 100x, é colocada uma gota de óleo de imersão nas tampas, exatamente onde você deseja observar e, posteriormente, o revólver do microscópio se move para localizar o alvo 100x na preparação na preparação.

A intensidade da luz é regulada (aumenta) (movendo o condensador e abrindo o diafragma). Então, com pequenos movimentos que são dados ao parafuso micrômetro (para frente ou para trás), ele deve se concentrar perfeitamente se o microscópio usar objetivos parafocais.

Se você tentar concentrar a preparação diretamente com o objetivo de imersão, poderá ter problemas para encontrar a abordagem. Não é uma ação impossível, mas a dificuldade aumenta significativamente.

Cuidado

Para usar o óleo de imersão, certas condições devem ser levadas em consideração.

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Quando uma preparação colorida foi realizada, como um lixo. Caso contrário, o óleo junto com a água formará micelas que não permitirão que a preparação visualize.

Por outro lado, depois de observar o número de preparativos, isto é, no final do dia de trabalho, o objetivo 100x deve ser cuidadosamente limpo, usando um papel para lente com etanol. Se a lente suja for deixada, o óleo secará nela e será muito difícil removê -lo, danificando o campo de visualização.

Da mesma forma, devemos ter em mente que o óleo é inflamável e deve estar longe de fontes de calor (isqueiros). É importante evitar aquecê -lo acima de 65 ° C.

Finalmente, o petróleo é um produto tóxico. Portanto, contato direto com as membranas de pele e mucosas, onde pode causar leve irritação. Para evitar acidentes, é recomendável usar luvas e lentes de segurança para manipulá -las.

Caso você tenha contato com o óleo, a área com muita água deve ser lavada. Se o óleo de splen nos olhos, deve ser lavado da mesma maneira, mantendo os olhos abertos. Em caso de ingestão acidental, é importante comer água morna e induzir vômitos, além de ir ao médico mais próximo.

Referências

1. “Microscópio de fluorescência para reflexão interna total." Wikipedia, enciclopédia livre. 30 de dezembro de 2018, 22:46 UTC. 14 de maio de 2019, 01:54
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