Características do Red Congo, preparação e aplicações

Ele Congo vermelho É um corante azóico de proteína, formado pelo acoplamento de um sal de diazônio e um anel aromático ativo. Esta substância é capaz de absorver a radiação eletromagnética no espectro visível, e é por isso que apresenta uma cor intensa.

É negativamente carregado. Portanto, tem uma afinidade para componentes celulares carregados positivamente, como certas substâncias proteicas. Sua cor varia de acordo com o pH. Nesse sentido, se o meio for ácido (pH 5,2 a cor é vermelha intensa.

Solução desidratada e coloidal vermelha do Congo. Fonte: Pixinio.com e Wikipedia.com

É uma substância muito versátil, pois possui vários utilitários. Foi usado como corante na indústria têxtil e também para células e tecidos.

Também para realizar meios de cultura que medem a ação enzimática, como um indicador de pH, como uma substância de controle na avaliação do funcionamento adequado dos espetofotômetros, no estudo da formação de biofiltros ou no diagnóstico de amilóides.

Da mesma forma, permitiu distinguir sorotipos bacterianos e de fungos pela identificação de estruturas específicas em sua parede (lipopolissacarídeos).

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Características do Congo Red

Esta substância foi descoberta por Böttiger em 1884. É um derivado de diazônio formado pelo bis-diazóico da benchnina com ácido naftional. A molécula vermelha do Congo mede 21 Armstrong e o peso molecular é de aproximadamente 8000 g/mol.

O Red do Congo é caracterizado por ser solúvel em água, e ainda mais em solventes orgânicos como o etanol, formando uma solução coloidal.

Tem uma afinidade pela celulose, pelo tecido amilóide e por componentes celulares carregados positivamente.

Preparação

O Red do Congo é preparado em diferentes concentrações, dependendo da técnica a ser usada. A maioria usa o Congo Red a 1%, 2%, 0,1%, entre outros.

Por exemplo, para preparar 2% Congo Congo deve pesar 2 g de corante desidratado e adicionar 100 ml de água destilada. Então é armazenado em uma garrafa âmbar.

Formulários

Como corante na indústria têxtil

Por um tempo, foi amplamente utilizado na indústria têxtil devido à sua fixação no algodão, mas atualmente é desuso porque é carcinogênico e também porque a cor não é estável, descolorando através do atrito.

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Determinação da capacidade de formação de biofilmes

Foi demonstrado que a capacidade de formação de biofillers de microrganismo é um fator de virulência.

Nesse sentido, o corante vermelho do Congo é usado como um método para determinar a formação de biofilme. O Red do Congo se liga aos exopolisacarídeos presentes no biofilme. No entanto, comparado a outros métodos é o menos recomendado pelos altos falsos negativos que ocorrem.

O método usa o ágar vermelho do Congo, composto por ágar sanguíneo como base, glicose (10 g/L) e o corante vermelho do Congo (0,4 g/L). As cepas a serem avaliadas são semeadas no meio e são incubadas por 24 horas a 37 ° C e subsequentemente incubadas por 48 horas à temperatura ambiente.

Um teste positivo é evidenciado se as colônias cristalinas de aparência negra e seca forem observadas.

Controle de qualidade SpectOfotômetros

Para avaliar se o equipamento de absorvância ou processamento de processamento está cumprindo os parâmetros fotométricos estabelecidos por regulamentos internacionais, uma técnica simples pode ser executada que permite estabelecer se o equipamento emite resultados dentro dos intervalos de aceitabilidade.

Uma das técnicas de avaliação é usar o Congo Red, com base no ponto isosbético.

É chamado de ponto isosbético para o comprimento de onda em que o Red do Congo emite a mesma absorvância independentemente do pH, concentração e temperatura. O valor de absorvância é fixo e pode ser usado como referência.

Sabe -se que o ponto isosbhético teórico do Congo Red é 541 nm. Se o valor obtido for diferente, sabe -se que o equipamento apresenta problemas de mudança de comprimento de onda e precisará ser revisado por um técnico especializado.

Preparação de meios de cultura

Ortiz e os colaboradores descrevem um meio de cultura preparado com coloração vermelha do Congo e carboximetilcelulose chamada ágar CMC, a fim de detectar cepas microbianas de celulite; isto é, produtores celulares (endogluconeses, exoglucanase e ß-glucosidase).

Este meio tem uma coloração intensa. A cor será dissipada pela ação da enzima endoglucanase que quebra a estrutura da carboximetilulose. Isso sugere uma reação positiva.

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A diminuição da viscosidade e absorvância permite a quantificação da atividade da enzima. Por exemplo, em cepas de Streptomyces sp.

Identificação de microorganismos

O Congo Red tem afinidade por estruturas de polissacarídeos de certas cepas, alcançando a identificação desses microorganismos. Entre eles estão os Escherichia coli, e a Shigella Flexneri.

As placas de ágar vermelho do Congo também são usadas para obter colônias características, como  Azospirillum sp, que dá colônias escarlas vermelhas, entre outras.

Coloração de células e tecidos

Uma das aplicações mais comuns do Congo Red é sua utilidade no diagnóstico de amiloidose. Esta doença estranha consiste no acúmulo extracelular de uma proteína anormal em vários órgãos. Esta proteína anômala é produzida na medula óssea e é chamada de amilóide.

O Red do Congo tem uma alta afinidade por esta substância. Esta propriedade foi usada para demonstrar sua presença em tecidos histológicos. O Red do Congo é usado ao lado da hematoxilina/eosina para esse fim.

A união do tecido amilóide e o vermelho do Congo é dado através das ligações não polares de hidrogênio, entre os grupos carboxil e o grupo amino. A proteína amilóide fornece os grupos carboxila (COOH) e o Congo Red the Amino Group.

O tecido amilóide é colorido em vários tons que variam de rosa a vermelho intenso visto no microscópio óptico. Nos microscópios com luz polarizada dupla, essas preparações são observadas com um birrefringnce verde de maçã verde.

Isto é, eles apresentam dicroísmo, já que as fibras da Amielóide são anisotrópicas. Esta observação confirma o diagnóstico.

A coloração dos tecidos vermelhos do Congo é compatível com outras metodologias de diagnóstico, como métodos imunocitoquíticos, sendo capazes de até mesmo presolir.

Como indicador de pH

A propriedade de girar na frente das mudanças de pH é usada pela técnica chamada cromoendoscopia.

Esta técnica usa indicadores de coloração e pH para colorir e pH que permitem que certas patologias sejam detectadas. Entre eles está o uso do Congo Red, que pode revelar os holofotes precoces do câncer na mucosa gástrica, sendo usados ​​como marcador de acidez.

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A técnica é baseada no fato de que o vermelho pH vermelho é preto é preto. Portanto, depois de colocar uma solução de Red Congo na mucosa gástrica, as áreas onde há palidez para levar a amostra para biópsia serão escolhidas, ou seja, onde não há produção de ácido. Isso sugere a presença de um foco canceroso ou perda de células parietais.

Referências

1. “Congo vermelho." Wikipedia, enciclopédia livre. 8 de maio, 12:13 UTC. 16 de maio, 04:08, é.Wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Novo método para a quantificação da atividade de endoglucanase baseada no complexo celulose-rojo Congo. Orinoquia [Internet]. 2011 junho [citado em 2019 15 de maio]; 15 (1): 7-15. Disponível em: Scielo.org.
3. Peña J, Uffo ou. Produção de biofilme em genótipos de Staphylococcus aureus Mastite bovina isolada em Cuba. Rev Health Anim.  [Internet]. 2013 de dezembro [citado em 16 de maio de 2019]; 35 (3): 189-196. Disponível em: Scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Manifestações cutâneas de amiloidose sistêmica como uma chave de diagnóstico: caso clínico. Rev. Méd. Chile [Internet]. 2012 abril [citado em 16 de maio de 2019]; 140 (4): 499-502. Disponível em: Scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sessini S, Mazziotta D. Espectrofotômetros e fotocolloímetros Guia prático de atualização. Bioquímica Clínica Latino-Americana [Online] 2005, 39 (SeptUe-sempre): [Data da consulta: 15 de maio de 2019] Disponível em: Redalyc.org
6. Marín J, Díaz J e Solís J. Cromoendoscopia na infecção por Helicobacter pylori: É um tempo de reação? Rev Esp Savm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Quimica Organica. Editorial revertido. Barcelona Espanha. Disponível em: livros.Google.co.ir
8. Murillo m. Técnicas de coloração histológica. Universidade de Guadalajara, México. Disponível em: Academia.Edu
9. Paillié m. Determinação de atividade celulolítica, ligninolítica e amilolítica de actinobactérias isoladas de solo rizosférico de trevo branco (Trifolium Reng).2012. Pontificia Universidad Javeriana Faculdade de Ciências Microbiologia Industrial Bogotá D.C. Disponível em: repositório.Javeriana.Edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Isolamento e identificação de cepas de Azospirillum sp. Em Pasto da Guiné (Panicum máximo jacq.) Del Valle del Cesar. Pastagens e forragem, 2010; 33 (3): 1-8 Disponível em: Scielo.